(Akym sitometriýasy, FCM) reňklenen öýjük markerleriniň floresan intensiwligini ölçän öýjük analizatorydyr. Singleeke öýjükleri seljermek we sortlamak esasynda işlenip düzülen ýokary tehnologiýaly tehnologiýa. Ölçegini, içki gurluşyny, DNK, RNK, beloklary, antigenleri we öýjükleriň beýleki fiziki ýa-da himiki aýratynlyklaryny çalt ölçäp we toparlara bölüp biler we bu klassifikasiýalaryň ýygyndysyna esaslanyp biler.
Akym sitometri esasan aşakdaky bäş bölekden durýar:
1 Akym kamerasy we suwuklyk ulgamy
2 Lazer ýagtylyk çeşmesi we şöhle şekillendiriş ulgamy
3 Optiki ulgam
4 Elektronika, saklamak, görkezmek we derňew ulgamy
Öýjükleri sortlamak ulgamy
Olaryň arasynda lazer ýagtylyk çeşmesinde we şöhle emele getiriş ulgamynda lazer tolgunmasy akym sitometriýasyndaky floresan signallarynyň esasy ölçegidir. Tolgundyryjy ýagtylygyň intensiwligi we täsir ediş wagty floresan signalynyň intensiwligi bilen baglanyşykly. Lazer, bir tolkun uzynlygyny, ýokary intensiwligi we ýokary durnukly yşyklandyryşy üpjün edip bilýän sazlaşykly ýagtylyk çeşmesidir. Bu talaplary kanagatlandyrmak üçin iň amatly tolgundyryjy çeşme.
Lazer çeşmesi bilen akym kamerasynyň arasynda iki silindr görnüşli linzalar bar. Bu linzalar lazer çeşmesinden has kiçi kesişli (22 μm × 66 μm) elliptik şöhlä çykýan tegelek kesişli lazer şöhlesini jemleýär. Bu elliptik şöhläniň içindäki lazer energiýasy, adaty paýlanyşa görä paýlanýar, lazer kesgitlemek meýdanyndan geçýän öýjükler üçin yzygiderli yşyklandyryş intensiwligini üpjün edýär. Beýleki tarapdan, optiki ulgam takmynan iki topara bölünip bilýän linzalardan, çukurlardan we süzgüçlerden ybaratdyr: akym kamerasynyň ýokarky we aşaky akymy.
Akym kamerasynyň öňündäki optiki ulgam linzadan we çukurdan durýar. Obýektiviň we çukuryň (köplenç iki linza we çukur) esasy wezipesi, lazer şöhlesini lazer çeşmesi tarapyndan çykýan tegelek kesiş bilen has kiçi kesişli elliptik şöhlä gönükdirmekdir. Bu, lazer energiýasyny adaty paýlanyşa görä paýlaýar, lazeri kesgitleýän ýerdäki öýjükler üçin yzygiderli yşyklandyryş intensiwligini üpjün edýär we azaşýan yşykdan päsgelçiligi azaldýar.
Süzgüçleriň üç esasy görnüşi bar:
1: Uzyn geçiş süzgüji (LPF) - diňe tolkun uzynlygy belli bir bahadan ýokary bolan ýagtylygy geçmäge mümkinçilik berýär.
2: Gysga geçişli süzgüç (SPF) - diňe belli bir bahadan pes tolkun uzynlygy bolan ýagtylygyň geçmegine mümkinçilik berýär.
3: Zolakly süzgüç (BPF) - diňe belli bir tolkun uzynlygyndaky ýagtylygyň geçmegine mümkinçilik berýär.
Süzgüçleriň dürli kombinasiýalary, dürli tolkun uzynlyklarynda floresan signallaryny aýratyn fotomultipleýji turbalara (PMT) gönükdirip biler. Mysal üçin, PMT-iň öňündäki ýaşyl floresanlygy (FITC) kesgitlemek üçin süzgüçler LPF550 we BPF525. PMT-iň öňündäki mämişi-gyzyl floresan (PE) kesgitlemek üçin ulanylýan süzgüçler LPF600 we BPF575. PMT-iň öňündäki gyzyl floresan (CY5) kesgitlemek üçin süzgüçler LPF650 we BPF675.
Akym sitometriýasy esasan öýjükleri tertiplemek üçin ulanylýar. Kompýuter tehnologiýasynyň ösmegi, immunologiýanyň ösmegi we monoklonal antikor tehnologiýasynyň oýlanyp tapylmagy bilen, biologiýa, lukmançylyk, dermanhana we beýleki ugurlarda ulanylyşy has giňden ýaýbaňlanýar. Bu programmalara öýjük dinamikasynyň derňewi, öýjük apoptozy, öýjük ýazmak, çiş diagnozy, neşe serişdeleriniň netijeliligini seljermek we ş.m. girýär.
Iş wagty: 21-2023-nji sentýabr
